技术而精心设计,可适用于人类和哺乳动物卵母细胞、早期胚胎、囊胚,卵巢和睾丸组织以及单精子的玻璃化冷冻。
产品优势:
特殊的材料(具有极佳导热性与表面张力的高分子材料)制造;
精良的加工工艺和人性化的使用设计;
样品存放处经过准确的载体和液体表面流体动力学设计,有无使用经验,绝不会丢失被冷冻样品;新手与熟手 可获得一样的冷冻与解冻效果;
大方的外观及良好的手感;
样品信息既可以直接标记在主体处,也可以标签于前段手柄处;
载杆有不同的颜色,更便于区分;
复苏成活率极高,可以有效地保存 DNA 的完整性。
可以显著地降低冷冻-解冻周期的流产率。
产品构成:
iVitri®-EZ 玻璃化冷冻载杆主要包括两部分:玻璃化冷冻装置主体和外套。在每一个标有 iVitri-EZ 标识的手柄上,
可用记号笔记录病人的姓名、身份证号或出生日期等。
操作程序:
本产品既适用于玻璃化冷冻的封闭式操作,也可用于开放式操作。如采用开放式操作,其操作流程与其它开放式载 杆的操作流程基本一致: 冷冻:
1、遵循常规玻璃化冷冻操作流程,先在手柄处标记或者粘贴病人的姓名和身份证等必要的信息。
2、打开外套,将载杆细端(即有黑色标记的一端)放置在显微镜下,把含有卵母细胞或胚胎(1~3 个)或组织的 玻璃化溶液(1~2μ 升)放置在黑色标记的附近,可尽量降低液滴的大小,但绝对不能吸干液体(图 1)。
3、手握载杆手柄端,将装有卵子或胚胎或组织液滴的载杆细端迅速插入到新鲜液氮中(图 1)。
4、加外套。用长镊子或者手术钳将外管夹住,插到液氮中,直到停止起气泡,先将外套轻轻盖入载杆,然后再用 力盖紧载杆;必要时用力拧一下,以防外套脱落。注:外套盖入时不必苛求同主体方正一致,以套紧为主。
5、将已经玻璃化冷冻好的载杆手柄向上,外套端朝下转入冷冻铝支架套管中,并储存在液氮中。
解冻:
1、取出装有病人载杆的吊筒,并放置到一个盛有液氮的泡沫盒中,用液氮完全覆盖住玻璃化载杆,检查并核对病
人标签上的信息。
2、用长的镊子夹住 iVitri®-EZ 载杆杆体,从吊筒中取出。随后手持载杆手柄,在液氮中用长镊子去除外套,然后 按照玻璃化解冻液的标准操作流程,对载杆上的卵子或胚胎或组织(样品)予以解冻。
4、解冻时 logo 面朝下,即样品面首先接触到解冻液(小滴 30-50 微升或 1-ml 小皿)。也即扣着接触到解冻液, 拉动一两下样品就会解脱下来了(图 2)。建议复苏时间:胚胎与囊胚 2 小时,卵母细胞 3 小时。